肝脏的TEM组织取材固定方法 [复制链接]

肝细胞是高度分化的多极性上皮细胞。肝细胞显微和亚显微水平的相似形态，以及肝细胞功能的趋同，容易忽视肝脏定位和定向取材的必要性。但实验证明：由于肝脏在接受肝动脉供血供氧之外，还有门静脉携带各种营养物质输入肝内进行多种代谢，而且每条血管首先到达肝脏的解剖分区不同，其物质摄取功能、生物转化功能等均存在较大差异；另外，即便同一个肝脏解剖分区，肝腺泡Ⅰ带、Ⅱ带至Ⅲ带也存在肝细胞异质性，比如：线粒体的体积、线粒体嵴发达程度、数量和分布，内质网的发达程度和分布，高尔基复合体的体积和数量，以及溶酶体、微体、核糖体和糖原等胞质成分等。这应该在取材时就考虑清楚，避免在电镜下误把肝细胞本身的异质性与实验结果混为一谈。

囿于肝细胞的异质性，取材最好根据肝血管和胆管分支划分的肝区和肝段，虽与解剖学肝叶的划分稍有不同，但更适于作电镜样品取材的解剖依据。应针对研究内容选择区段，并保持实验组和对照组之间的位点统一。解剖位点切取体积约为1mm×2mm×3mm长方体，并按上述方法快速切割成2粒1mm×1mm×3mm样品条，其长轴方向或平行或垂直于血管走向，便于确定在包埋块顶端的摆放及光镜半薄切片定位，使超薄切片观察视野具有明确的组织学和解剖学支持。